微孔膜—防水透气膜在实验分析中的应用

2018-09-11 13:40 创承科技
      生物化学中很多实验操作是把一种物质和另一些物质分开,最常用的有各种离心、电泳、层析等方法,而过滤法是一种古老但仍常用的分离技术。近十多年来发展了具有不同孔径的微孔滤膜(0.1~10μm)和超过滤膜(约6~36nm),使过滤技术进人了亚细胞水平和分子水平,成为分子生物学工作者所采用的一种很简单, 但又是十分重要的技术。


       微孔滤膜可以根据它的孔径大小不同而用于收集各种不同大小粒子,在进行细胞和细胞器的研究工作中,一般称为绝对过滤。很多厂商供应的微孔滤膜就是根据生物样品的大小制造的。在应用微孔滤膜技术的过程中,人们发现纤维素酯型微孔滤膜还具有一种特殊的吸附性质,这种吸附性质使纤维素酯型微孔滤膜能结合一些生物高分子,而这些生物高分子实际上要比微孔滤膜的孔径小得多,按绝对过滤的概念是不可能被微孔滤膜表面所截留住的。根据纤维素酿型微孔滤膜的这种吸附性质建立了许多结合测定法,为现代生化分析技术做出了重要的贡献,在分子生物学中应用极为广泛。




        EPTFE微孔滤膜过滤技术在生物化学方面的应用有下列几个优点。

        ①方法简单,只要根据工作需要选择种合适的微孔滤膜和采用一般的吸滤装置,不需要其他的特殊仪器。

        ②使用方便,重复性好,全部操作(由收集样品、分离、洗涤、干燥、直到最后鉴定和定量)在同一片均匀的微孔滤膜的表面上进行,这样不存在丙样品转移而引起的损失导致结果偏低;也不会由于洗涤不充分导致结果偏高,所以重复性好。

        ③快速,收集有样品的微孔滤膜可以很快地充分洗涤。而用经典的离心法收集沉淀和洗涤,不但操作繁琐而目要花费很多时间。特别应用多支管的过滤装置可以同时进行几十个样品的过滤。 另一方面,单个样品的收集和洗涤,能在几秒钟内完成,适用于研究小分子快速转移的动力学过程。


        如前所述,各种孔径的网状型微孔滤膜是根据生物样品的大小制造的。收集的沉淀粒子非常小,很多是肉眼看不到的。例如酵母菌用1. 2μm的微孔滤膜可以完全收集到,大肠杆菌则需用0.45μm的微孔滤膜来收集。从理论上讲,这类收集是绝对收集,不像深层型滤纸过滤时可能漏过1%~2%,但实际上往往并不是那么绝对的,会受到很多因素影响,在除菌操作中更要注意这一点。